Molecular identification and histological aspects of Renicola sloanei (Digenea: Renicolidae) in Puffinus puffinus (Procellariiformes): a first record / Identificação molecular e aspectos histológicos de Renicola sloanei (Digenea: Renicolidae) em Puffinus puffinus (Procellariiformes): primeiros registros

Abstract Renicolids are parasites that inhabit the renal tubules and ureters of molluscivorous and piscivorous birds. Puffinus puffinus is a migratory seabird that was identified as the definitive host of Renicola spp. Studies focusing on the renicolid species and the resulting renal lesions are valuable for their association with causes of stranding in seabirds. The aim of this study was to identify the renicolid trematodes and evaluate the histological findings in two P. puffinus stranded on the coast of Paraná state, Brazil. The parasites were evaluated by histologic, ultrastructural and molecular assays, while tissue changes were analyzed by histologic methods. The morphological and morphometrical characteristics of the parasites, along with polymerase chain reaction and sequencing assays (ribosomal and mitochondrial regions), identified the species as Renicola sloanei. The results also suggest that this helminth can be the adult form of Cercaria pythionike. The dilation of collecting ducts was the main histological finding in the kidneys. In conclusion, R. sloanei was identified, and for the first time, P. puffinus was described as a host of this digenean inducing mild renal changes.

Resumo Renicolídeos são parasitos que habitam túbulos renais e ureteres de aves que se alimentam de moluscos e peixes. Puffinus puffinus, ave marinha migratória, foi registrada como hospedeiro definitivo de Renicola spp. Estudos relacionados com as espécies de renicolídeos e as lesões renais resultantes são importantes para o entendimento das causas de óbito de aves marinhas. O objetivo deste estudo foi identificar os trematódeos renicolídeos e avaliar os achados histológicos em dois P. puffinus encalhados no litoral do Estado do Paraná, Brasil. Os parasitos foram avaliados por ensaios histológicos, ultraestruturais e moleculares, enquanto as alterações teciduais foram analisadas por métodos histológicos. As características morfológicas e morfométricas dos parasitos, juntamente com a reação em cadeia da polimerase e sequenciamento (regiões ribossomal e mitocondrial), identificaram a espécie como Renicola sloanei. Os resultados também sugerem que este helminto pode ser a forma adulta de Cercaria pythionike. A dilatação dos ductos coletores foi o principal achado histológico renal. Em conclusão, R. sloanei foi identificado, e pela primeira vez P. puffinus foi descrito como hospedeiro deste digenético induzindo alterações renais discretas.

Hemangiopericytoma in a female dog with direct invasion of abdominal cavity and pulmonary metastasis / Hemangiopericitoma em uma cadela com invasão direta da cavidade abdominal e metástase pulmonar

An intact adult female Poodle dog was presented with a history of an increase in volume in the left and right mammary inguinal glands. The histopathological examination revealed a proliferation of spindle cells arranged in bundles with concentric arrangements surrounding blood vessels, occasionally collapsed. Three weeks after the surgery, the animal presented a recurrence of the tumor that extended from the left inguinal mammary gland to the vulva. Necropsy revealed direct invasion of the abdominal cavity by the tumor and pulmonary metastasis. The definitive diagnosis of hemangiopericytoma was made by histopathological and immunohistochemical examination. Pulmonary metastasis of CHP (canine hemangiopericytoma) is rare and there is no previous report of direct invasion to the abdominal cavity as observed in the present case.

Uma cadela adulta, intacta, da raça Poodle, apresentou histórico de aumento de volume na mama inguinal direita. O exame histopatológico revelou proliferação de células fusiformes dispostas em bandas e arranjos concêntricos ao redor de vasos, os quais se apresentavam ocasionalmente colapsados. Três semanas após a cirurgia, o animal apresentou recorrência do tumor que se estendia até a vulva. No exame necroscópico, observou-se que a massa invadia a cavidade abdominal e presença de metástase no pulmão. O diagnóstico definitivo de hemangiopericitoma foi realizado por meio dos exames histopatológico e imuno-histoquímico. A metástase pulmonar do hemangiopericitoma canino é rara e não há relatos prévios de invasão direta para cavidade abdominal, como observado no presente caso.

Imunoistoquímica: detecção de microcistina em tilápia exposta ao extrato de Microcystis aeruginosa (Cyanobacteria) / Imunohistochemistry: detection of microcystin in tilápia exposed to Microcystis aeruginosa (Cyanobacteria) extract

A deterioração da qualidade de água pela piscicultura associa-se à eutrofização, com florescimento de cianobactérias. Microcystis aeruginosa destaca-se como principal produtora de microcistinas (MCs), grupo de hepatotoxinas com potencial promotor de tumor. No presente trabalho desenvolveu-se método imunoistoquímico para a detecção de MC em tilápias (Oreochromis niloticus) submetidas à injeção intraperitoneal (i.p.) ou imersão em extrato de M. aeruginosa BCCBUSP 262, empregando anticorpo monoclonal anti-MC (M8H5) e sistema polímero-peroxidase. As tilápias (N=42) foram submetidas a sete tratamentos, sendo três grupos inoculados i.p. com 2,0x105, 4,0x105 e 1,0x106 cels.Kg-1 de M. aeruginosa BCCBUSP 262 e quatro submetidos à imersão em diferentes concentrações do extrato da cianobactéria (variando de 1,0x104 a 1,0x105cel.mL-1). Analisando fígado e tecido muscular pelo ensaio imunoistoquímico, não se detectou marcação em tecido muscular. Todos os animais inoculados i.p. apresentaram marcação positiva para MC no fígado, mas em teste de imersão, apenas os expostos a maior dose (1,0x105 cels.mL- 1) apresentaram marcação positiva. Embora MC não seja detectada em tecido muscular, assim como no fígado de animais imersos em extrato de M. aeruginosa CCBUSP 262 em concentrações menores que 1,0x105 cels.mL-1, os resultados constituíram-se base para o desenvolvimento metodológico objetivando a aplicação da imunoistoquímica no diagnóstico rápido no controle de qualidade de pescados.

The deterioration of the water quality due to aquaculture is associated with eutrophication, with bloom of cyanobacteria. Microcystis aeruginosa is distinguished as main producer of microcystins (MCs), group of hepatotoxins with tumor promoter potential. In the present work immunohistochemical method for detection of MC in tilápia (Oreochromis niloticus), fish submitted to intraperitoneal injection (i.p.) or immersion in extract of M. aeruginosa BCCBUSP 262 was developed, using monoclonal antibody anti- MC (M8H5) and polymer peroxidase system. The tilápias (N=42) had been submitted to the seven treatments, three groups inoculated i.p. with 2.0x105, 4.0x105 and 1.0x106 cells. Kg-1 of M. aeruginosa BCCBUSP 262 and four groups exposed to the immersion in different extract concentrations of cyanobacterium. Analyzing liver and muscular tissue for immunohistochemical assay, muscular tissue was not stained. All the animals inoculated i.p. presented positive marking for MC in the liver, but in immersion test, only the ones exposed in the highest dose (1,0x105 cels.mL-1) presented positive marking. Although MC was not detected in muscular tissue, as well as in the liver of animals immersed in extract of M. aeruginosa BCCBUSP 262 in concentrations less than 1.0x105 cels.mL-1, the results would constitute in the base for the methodological development aiming the application of the immunohistochemistry in the rapid diagnosis in quality control of fish.

Estudo retrospectivo de linfoma canino no período de 1990 - 2004 na região norte do Paraná / Retrospective study of canine lymphoma in period 1990 - 2004, north region the of Paraná

O linfoma canino é a principal neoplasia de origem hemolinfática. Foram analisados 186 casos de linfoma diagnosticados entre 1990 a 2004. Observou-se que cães machos apresentaram uma ocorrência maior (58,6%) do que em fêmeas (41,4%). A idade média dos animais acometidos foi de 5,9 anos. As maiores ocorrências do linfoma foram observadas em cães sem raça definida (40,3 %), Pastor Alemão (8,6%), Rottweiler (8,1%) e Boxer (7,0%). Quanto à classificação anatômica e estadiamento clínico, a maior ocorrência foi a da forma multicêntrica(68,8%) e os estádios III (37,1%) e IV (43,5%), respectivamente.

Canine malignant lymphoma (CML) is a common lymphoid tumor.Canine lymphomas from 1990 to 2004 (n=186) were analyzed onepidemiological aspects. The occurrence of CML in males ( 58,6%)was greater than in females (41,4%). The middle age of affected dogs was 5,9 years. The most common breeds in this study were mixedbreed (40,3%), German Sheepdog (8,6%), Rottweiler (8,1%) and Boxer (7,0%). For the anatomical classification and the clinical stagingof CML, the most common were multicentric form (68,8%) andstage III (37,1%) and IV (43,5%), respectively.

Linfoma canino de células T: aspectos epidemiológicos, clínicos e morfológicos de 38 casos / Canine T - cell lymphoma: a morphological, epidemiologic and clinical study of 38 cases

O objetivo deste trabalho foi avaliar a ocorrência e aspectos clínicos,morfológicos e imunoistoquímicos de linfomas caninos de células T.Foram avaliados 71 cães com linfoma, dos quais 38 foram classificadosimunoistoquimicamente como células T. Conforme a classificação daWorking Formulation e Kiel 18 foram classificados como grauintermediário de malignidade, 15 de alta malignidade e 5 de baixamalignidade. O padrão de proliferação linfomatoso foi difuso emtodos os animais (38). O linfoma de células T foi mais comum emcães de raça definida (24/38), como Boxer, Cocker Spaniel Inglês eRottweiler. A ocorrência de linfoma T em machos (21/38) foi maiordo que em fêmeas e a idade média foi de 5,8 anos (1-13 anos). Quantoà classificação anatômica e estadiamento clínico do linfoma de célulasT, a forma multicêntrica (29/38) foi a mais comum e os estádios IV (15/38) e III (14/38), respectivamente.

The aim of this study was to evaluate the incident and clinical,morphological and immunological aspects of canine T-celllymphomas. From 71 canine lymphomas, 38 were classified byimmunohistochemistry as T-cell lymphomas. According to theWorking Formulation and Kiel classification, 18 were classified asintermediate-grade, 15 as high-grade and 5 as low-grade. The patternof lymphomatous proliferation was diffuse in all 38 animals. T-celllymphoma was more common in defined breeds (24/38), such asBoxers, English Cockers and Rottweilers. The occurrence of T-celllymphoma in males (21/38) was greater than in females and themedian age was 5.8 years (1 to 13 years). For the anatomical classificationand the clinical staging of T-cell lymphomas, the most common weremulticentric form (29/38) and stage IV (15/38) and III (14/38), respectively.

Ocorrência de enteropatia proliferativa em suínos abatidos no Paraná / Occurrence of proliferative enteropathy in swine slaughtered on the Paraná state

A enteropatia proliferativa dos suínos agrupa diversas patologias com aspectos macroscópicos diferentes: adenomatose intestinal, ileíte regional, enterite necrótica e enteropatia proliferativa hemorrágica. Estudou-se a ocorrência de enteropatia proliferativa em suínos abatidos no estado do Paraná, onde foram colhidas amostras de duodeno, jejuno, íleo, cólon e linfonodo mesentérico de 389 animais. As amostras foram obtidas em três frigoríficos do estado, sendo um na regiäo Norte, um na regiäo Sudeste e um na regiäo Sudoeste. Do total de animais, 12 foram positivos, o que representa 3,08 por cento. A única forma da doença encontrada foi a adenomatose intestinal. O diagnóstico foi caracterizado pelas alteraçöes histopatológicas provocadas pelo agente no trato intestinal afetado.

Implantação intra-orbital, após a enucleação transpalpebral, de resina acrílica ou pericárdio em coelhos / Intraorbital implantation of acrylic resin or pericardium after transpalpebral enucleation in rabbits

Dezoito coelhos, Norfolk, fêmeas, com 45 dias de idade foram divididos em três grupos de seis animais e submetidos a enucleação transpalpebral. Os animais do grupo I receberam na cavidade orbitaria acrílico auto-polimerizável, os do grupo II pericárdio eqüino conservado em glicerina e os do grupo III foram mantidos como controle. Para avaliação macroscópica e histopatológica das cavidades orbitarias, três animais de cada grupo foram sacrificados com 30 e 60 dias após a implantação. Apesar da resina ter sido aplicada na fase pastosa, na qual a alta temperatura que ocorre durante a polimerizaçâo pode ser lesiva aos tecidos, foi o produto que apresentou os melhores resultados.

Eighteen Norfolk female rabbits, 45 days old, were divided into three groups of six animals and submitted to transpalpebral enucleation. Animals of group I received intraorbital auto-polimerized acrylic resin, the ones of group II received eqüine pericardium preserved in glycerin solution and animals of group III were control. Three animals of each group were euthanised 30 and 60 days after implantation for macroscopic and histopathologic evaluation of the orbital cavities. Although the resin has been applied during the doughy phase in which the high temperature produced by polimerization could be dangerous to the tissue, it was the product that showed the best result.